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Biologisch abbaubare Tenside und die OECD-301-Reihe
Prüfmethoden

Welcher Test zu welchem Stoff passt, was die 60-%-Schwelle und das 10-Tage-Fenster wirklich verlangen und wie man ein 301B-Ergebnis liest.

Fachlich verantwortlich: Prof. Katalin Barta Weissert, CSO & Mitgründerin · Geprüft von Markus Köck · Letzte Prüfung:

Kurz gesagt

Die OECD-301-Reihe umfasst sechs Tests auf leichte biologische Abbaubarkeit, 301A bis 301F. Jeder setzt einen Stoff 28 Tage einem nicht adaptierten Inokulum aus. Bestanden ist bei 60 % des theoretischen Sauerstoffbedarfs oder CO2 beziehungsweise 70 % DOC-Abbau, erreicht innerhalb eines 10-Tage-Fensters.

"Biologisch abbaubar" gehört zu den unschärfsten Begriffen der Chemiekommunikation. Fast alles baut sich irgendwann ab. Behörden, Handel und Formulierungsleitung stellen eine engere Frage: Erreicht dieser Stoff eine definierte Abbaurate in einem definierten Zeitfenster unter einem definierten Test? Auf diese Frage gibt es eine genormte Antwort, und sie heißt OECD-301-Reihe.

Reihe
OECD 301A bis 301F
Bestehenskriterium
60 % ThSB oder ThCO2 bzw. 70 % DOC-Abbau in 28 Tagen
10-Tage-Fenster
Schwelle innerhalb von 10 Tagen nach Erreichen von 10 %
PureSurf-Ergebnis
F Eco 74,7 % ThCO2, OECD 301B (GLP); F Pro in abschließender Bewertung

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Leichte, inhärente und vollständige Abbaubarkeit

Leichte biologische Abbaubarkeit ist die strenge Kategorie. Sie arbeitet mit kleinem Inokulum, ohne Adaptionsphase und in kurzem Zeitfenster. Wer sie besteht, baut sich in den meisten Umweltkompartimenten rasch ab. Inhärente Abbaubarkeit ist die schwächere Aussage: Sie zeigt, dass ein Stoff unter günstigen Bedingungen abbaubar ist, nicht dass er es im realen Gewässer schnell tut.

Vollständige Abbaubarkeit bedeutet Mineralisierung zu Kohlendioxid, Wasser und Mineralsalzen ohne persistente Bruchstücke. Primärer Abbau heißt dagegen nur, dass das Ausgangsmolekül seine grenzflächenaktive Struktur verloren hat, was eine deutlich niedrigere Hürde ist.

Die sechs OECD-301-Tests im Vergleich

Alle sechs messen leichte biologische Abbaubarkeit, unterscheiden sich aber in Messgröße, Schwellenwert und Eignung für bestimmte Stoffe. Schwer lösliche oder flüchtige Substanzen schließen einzelne Methoden aus. Deshalb ist der gewählte Test relevant, wenn zwei Datensätze verglichen werden.

OECD 301A bis 301F: Prinzip, Messgröße, Schwelle und geeignete Stoffe.
MethodePrinzipMessgrößeBestehensschwelleAm besten geeignet für
OECD 301ADOC-Die-AwayAbbau gelösten organischen Kohlenstoffs, % DOC70 % in 28 TagenLösliche, nicht flüchtige, nicht adsorbierende Stoffe
OECD 301BCO2-Entwicklung (modifizierter Sturm-Test)Kohlendioxid, % ThCO260 % in 28 TagenNicht flüchtige Organika, Tenside, dispergierbare Stoffe
OECD 301CModifizierter MITI (I)Sauerstoffverbrauch im geschlossenen Respirometer, % ThSB60 % in 28 TagenStoffe mit standardisiertem Inokulum nach japanischem Vorbild
OECD 301DClosed BottleSauerstoffzehrung, % ThSB60 % in 28 TagenSchwer lösliche, niedrig dosierte und flüchtige Stoffe
OECD 301EModifizierter OECD-ScreeningtestAbbau gelösten organischen Kohlenstoffs, % DOC70 % in 28 TagenLösliche Stoffe im Screening bei geringer Inokulumdichte
OECD 301FManometrische RespirometrieSauerstoffbedarf, % ThSB60 % in 28 TagenTenside, gefärbte oder trübe Proben

Die Schwelle unterscheidet sich nach Messgröße, nicht nach Strenge: DOC-Methoden tragen die höhere 70-%-Hürde, weil Kohlenstoff durch Adsorption die Lösung verlassen kann, ohne mineralisiert zu sein.

OECD 301B: CO2-Entwicklung

In 301B ist der Prüfstoff die einzige Kohlenstoffquelle für ein kleines Inokulum, CO2-freie Luft wird durch die Gefäße geleitet, und das freigesetzte Kohlendioxid wird aufgefangen und quantifiziert. Das Ergebnis wird als Prozentsatz des theoretischen Kohlendioxids ThCO2 angegeben und misst die Mineralisierung damit direkt.

301B ist die für Tenside in Europa am häufigsten angeforderte Methode und vermeidet den Sauerstoffartefakt, den die Stickstofffreisetzung aminhaltiger Stoffe in respirometrischen Verfahren verursacht. NEXOVANT F Eco erreichte in einer GLP-Studie nach 301B 74,7 % ThCO2 in 28 Tagen.

OECD 301A und die DOC-Methoden

OECD 301A (DOC-Die-Away) und OECD 301E (modifizierter OECD-Screeningtest) verfolgen den gelösten organischen Kohlenstoff und verlangen 70 % Abbau statt 60 %. Sie sind einfach und günstig, solange der Stoff vollständig löslich ist und nicht adsorbiert.

Bei Tensiden werden die DOC-Verfahren zurückhaltend eingesetzt: Grenzflächenaktive Moleküle adsorbieren an Biomasse und Gefäßwänden, sodass Kohlenstoff aus der Lösung verschwinden kann, ohne abgebaut zu sein, und das Ergebnis den Abbau überschätzt.

OECD 301F: manometrische Respirometrie

301F misst den Sauerstoffverbrauch im geschlossenen Respirometer und gibt ihn als Prozentsatz des theoretischen Sauerstoffbedarfs ThSB an. Das Verfahren kommt mit gefärbten, trüben oder schwer löslichen Proben gut zurecht und liefert eine durchgehende Kurve, an der sich das 10-Tage-Fenster leicht prüfen lässt.

Der Vorbehalt betrifft Stickstoff: Setzt der Stoff Ammonium frei, zehrt die Nitrifikation Sauerstoff, der nichts mit dem Abbau des Kohlenstoffgerüsts zu tun hat. Ein 301F-Ergebnis zu einem aminhaltigen Stoff sollte daher angeben, ob es auf Ammoniumbasis berechnet ist.

Wie man ein Bestehen liest

Ein Stoff gilt als leicht biologisch abbaubar, wenn er innerhalb von 28 Tagen 60 % des theoretischen Sauerstoffbedarfs beziehungsweise der Kohlendioxidentwicklung oder 70 % DOC-Abbau erreicht. Die Schwellen liegen bewusst unter 100 %, weil ein Teil des Kohlenstoffs in mikrobielle Biomasse eingebaut und nicht veratmet oder entfernt wird.

Die Validitätskontrollen zählen so viel wie die Zahl selbst. Die Referenzsubstanz muss normal abbauen, der Inokulum-Blindwert niedrig bleiben, und die Toxizitätskontrolle muss zeigen, dass der Stoff die abbauenden Organismen nicht gehemmt hat.

Das 10-Tage-Fenster

Die Schwelle muss in einem 10-Tage-Fenster erreicht werden, das mit dem Überschreiten von 10 % Abbau beginnt. Das Fenster trennt Stoffe, die beim ersten Kontakt rasch abbauen, von Stoffen, die eine lange Anpassungsphase brauchen.

Daran scheitern viele Werbeaussagen still. Ein Stoff, der nach langsamem Start am Tag 27 auf 65 % kommt, hat das Kriterium nicht erfüllt, auch wenn die Schlagzeilenzahl überzeugend aussieht. Bei Mehrkomponentenstoffen kann das Fenster entfallen, wenn die Komponenten einzeln bewertet werden; ein Bericht, der sich darauf stützt, sollte das vermerken.

Wie man einen OECD-301-Bericht liest

Arbeiten Sie einen Bericht in dieser Reihenfolge durch, dann lässt sich der Prozentwert auf der Titelseite deutlich besser einordnen.

  • Studienidentität: Richtlinienfassung, GLP-Erklärung, Prüfeinrichtung und Unterschriftsdatum.
  • Prüfgegenstand: Bezeichnung, Charge, Reinheit und Bezug auf Aktiv- oder Gesamtgehalt.
  • Methode und Messgröße: 301A bis 301F sowie die Frage, ob 60 % oder 70 % gelten.
  • Validitätskriterien: Verhalten der Referenzsubstanz, Inokulum-Blindwert, Übereinstimmung der Parallelansätze.
  • Toxizitätskontrolle: Nachweis, dass der Stoff das Inokulum nicht vergiftet hat.
  • Die Abbaukurve, nicht nur der Endwert: Wo wurden 10 % überschritten, und kam die Schwelle in den folgenden 10 Tagen?
  • Der Wortlaut: "leicht biologisch abbaubar" gegenüber "unter den Testbedingungen nicht leicht biologisch abbaubar".

Nennt ein Lieferant einen Prozentwert ohne Methode, Dauer, Bezugsbasis und Aussage zum 10-Tage-Fenster, ist das Werbung und kein Datum. Fragen Sie die Studienreferenz an.

Wo die PureSurf-Chemie steht

NEXOVANT F Eco erfüllt das Kriterium der leichten biologischen Abbaubarkeit mit 74,7 % ThCO2 in 28 Tagen nach OECD 301B (GLP). F Pro befindet sich in der abschließenden Bewertung: Eine manometrische Respirometrie (OECD 301F) ergab 78,9 % ThSB auf Ammoniumbasis, der Bericht ist jedoch noch nicht unterzeichnet, und eine frühere OECD-301B-Studie erreichte 47,4 % ThCO2 und damit weniger als 60 %. Dasselbe GLP-Programm bestätigte, dass das Material nicht mutagen (OECD 471) ist, und charakterisierte die Gewässertoxizität nach OECD 201 und OECD 202.

Abbaubarkeit und Toxizität sind zwei getrennte Fragen, und beide zählen. Ein Molekül kann schnell abbauen und dabei akut toxisch wirken. Die Gewässertoxizität wird als EC50 angegeben: Algen (OECD 201, 72 h) 11,9 mg/L für F Eco und 1,49 mg/L für F Pro gegenüber 0,47 mg/L bei einem konventionellen Laurylaminoxid; Daphnia magna (OECD 202, 48 h) 42,9 mg/L bzw. >5 mg/L gegenüber 2,4 mg/L. Die Berichte sind in Finalisierung, daher wird kein Faktor veröffentlicht.

Häufige Fragen

Was ist der OECD-301B-Test?

OECD 301B, der modifizierte Sturm-Test, misst das Kohlendioxid, das Mikroorganismen freisetzen, während sie einen Stoff als einzige Kohlenstoffquelle abbauen. Der Test läuft 28 Tage, das Ergebnis wird als Prozentsatz des theoretischen Kohlendioxids (ThCO2) angegeben.

Was ist der Unterschied zwischen OECD 301B und 301F?

301B misst gebildetes Kohlendioxid (% ThCO2), 301F den Sauerstoffverbrauch im manometrischen Respirometer (% ThSB). Beide laufen 28 Tage mit 60-%-Schwelle. 301F passt zu trüben oder gefärbten Proben; 301B vermeidet den Sauerstoffartefakt durch Stickstofffreisetzung aus aminhaltigen Stoffen.

Wie lange dauert ein OECD-301-Test?

Der Test läuft 28 Tage. Mit Vorbereitung, Analytik, Berichterstellung und GLP-Qualitätssicherung liegt ein unterzeichneter Bericht üblicherweise acht bis zwölf Wochen nach Eingang der Substanz im Labor vor.

Was bedeutet das 10-Tage-Fenster?

Es ist der Zeitraum von 10 Tagen, der beginnt, sobald der Abbau erstmals 10 % überschreitet. Die Schwelle muss innerhalb dieses Zeitraums erreicht werden, nicht irgendwann bis Tag 28. So werden Stoffe ausgefiltert, die eine lange Anpassungsphase brauchen.

Sind 60 % Abbau ein guter Wert?

Ja. Bei den atmungsbasierten Tests sind 60 % im Fenster das formale Bestehen der leichten biologischen Abbaubarkeit. Ein Teil des Kohlenstoffs wird zu mikrobieller Biomasse statt zu Kohlendioxid, sodass 60 % bereits weitgehend vollständigem Abbau der verfügbaren Fraktion entsprechen.

Welcher OECD-301-Test eignet sich am besten für Tenside?

301B und 301F sind die beiden Arbeitspferde. 301B ist vorzuziehen, wenn Kohlendioxid das sauberere Signal ist, etwa bei aminhaltigen Tensiden. 301F passt zu trüben Proben oder wenn eine durchgehende Sauerstoffkurve gewünscht ist. Die DOC-Methoden werden zurückhaltend genutzt, weil Tenside an Biomasse adsorbieren.

Heißt leicht biologisch abbaubar dasselbe wie biologisch abbaubar?

Nein. Leichte biologische Abbaubarkeit ist eine strenge, definierte Einstufung aus einem 28-Tage-Test mit nicht adaptiertem Inokulum. "Biologisch abbaubar" allein steht für keinen Test, und inhärente Abbaubarkeit zeigt nur, dass ein Abbau unter günstigen Bedingungen möglich ist.

Was ist ThCO2?

ThCO2 ist das theoretische Kohlendioxid: die Masse CO2, die entstünde, wenn jedes Kohlenstoffatom des dosierten Stoffes vollständig oxidiert würde. Gemessenes CO2 geteilt durch ThCO2 ergibt den Abbaugrad einer 301B-Studie.

Ist biobasiert automatisch biologisch abbaubar?

Nein. Biobasiert beschreibt die Kohlenstoffquelle, Abbaubarkeit das Verhalten am Lebensende. Manche fossilen Moleküle bauen leicht ab, manche biobasierten nicht. Nur ein Prüfergebnis klärt das.

Ist NEXOVANT leicht biologisch abbaubar?

Typspezifisch. NEXOVANT F Eco erfüllt das Kriterium der leichten biologischen Abbaubarkeit (74,7 % ThCO2, OECD 301B, GLP); F Pro befindet sich in der abschließenden Bewertung, das unterzeichnete Ergebnis wird nachgereicht.

Letzte inhaltliche Prüfung: von Prof. Katalin Barta Weissert

Nachweis aus dem eigenen Portfolio: Zum GLP-301B-Ergebnis von NEXOVANT F Eco

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